產品更新-豬小腸上皮細胞
培養基 90%DMEM-H+10%FBS
傳代方(fang)法 復蘇(su)步驟(zou):①凍(dong)存管從液氮(dan)或(huo)-80℃冰箱中(zhong)取出放(fang)入(ru)PE手套中(zhong),迅(xun)速沒(mei)入(ru)37℃水浴鍋(guo),搖晃凍(dong)存管加(jia)速溶解(jie),以1min內(nei)全(quan)部溶解(jie)為(wei)宜(yi);②在超(chao)凈臺(tai)中(zhong)將溶解(jie)好的(de)細胞(bao)液加(jia)入(ru)到(dao)裝有9mL完(wan)-全(quan)培(pei)養基(ji)的(de)離心管內(nei),1000-1200rpm離心5min,棄去上清(qing)液,用1-2mL完(wan)-全(quan)培(pei)養基(ji)重懸(xuan)細胞(bao)。③將細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)到(dao)含有5-6mL完(wan)-全(quan)培(pei)養基(ji)的(de)T25瓶中(zhong),放(fang)入(ru)培(pei)養箱培(pei)養。
細(xi)胞(bao)(bao)(bao)傳代:①將舊培(pei)(pei)養液吸除,PBS清洗(xi)兩遍(bian)后,加入1-2mL胰酶(mei)(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下(xia)觀察(cha)消(xiao)化情況,在細(xi)胞(bao)(bao)(bao)邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起(qi)些許(xu)胰酶(mei)輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)(bao)(bao)層某處,肉(rou)眼可見細(xi)胞(bao)(bao)(bao)層脫落(luo),即消(xiao)化完(wan)(wan)成(cheng),否(fou)則(ze)繼續(xu)消(xiao)化),直接(jie)吸掉(diao)胰酶(mei),加入5-6mL完(wan)(wan)-全(quan)培(pei)(pei)養基,輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)(bao)(bao)層,把(ba)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)層吹(chui)落(luo),吹(chui)散。③將細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)液按1:2比例分(fen)到新的T25瓶(ping)中,添加適當的完(wan)(wan)-全(quan)培(pei)(pei)養基,把(ba)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)液打勻,于培(pei)(pei)養箱中培(pei)(pei)養。;④注意培(pei)(pei)養基pH值變(bian)化和細(xi)胞(bao)(bao)(bao)密度(du),定期換液(每(mei)周2-3次),待細(xi)胞(bao)(bao)(bao)密度(du)達到80%-90%時,重復傳代操作或(huo)者凍存。
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生長條件 培養溫度37℃;氣體環境5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 1
形態 上皮細胞樣,多角形,不(bu)規則(ze)形,邊緣不(bu)規則(ze),單層貼壁(bi)生(sheng)長,背景干凈,無空泡(pao)