產品更新-小鼠腦微血管內皮細胞

培養基 90%DMEM-H+10%FBS
傳代方法 復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放(fang)入(ru)PE手套中，迅速沒(mei)入(ru)37℃水浴鍋，搖(yao)晃凍存管加(jia)速溶(rong)解，以(yi)1min內全(quan)(quan)部溶(rong)解為宜(yi)；②在超(chao)凈臺中將溶(rong)解好的(de)細-胞(bao)液加(jia)入(ru)到裝有9mL完-全(quan)(quan)培(pei)養基的(de)離心(xin)(xin)管內，1000-1200rpm離心(xin)(xin)5min，棄去上清(qing)液，用1-2mL完-全(quan)(quan)培(pei)養基重懸細胞(bao)。③將細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)到含有5-6mL完-全(quan)(quan)培(pei)養基的(de)T25瓶中，放(fang)入(ru)培(pei)養箱培(pei)養。

細(xi)胞(bao)(bao)傳代：①將舊培(pei)(pei)養液(ye)(ye)(ye)(ye)吸(xi)(xi)除，PBS清洗(xi)兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下(xia)觀察消(xiao)化(hua)情況，在(zai)細(xi)胞(bao)(bao)邊緣(yuan)縮小(xiao)，貼壁松動(dong)時(shi)（可(ke)用吸(xi)(xi)管吸(xi)(xi)起(qi)些許胰酶輕輕吹打細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)某處，肉眼可(ke)見細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)脫(tuo)落，即消(xiao)化(hua)完成，否則繼續消(xiao)化(hua)），直(zhi)接吸(xi)(xi)掉胰酶，加入5-6mL完-全培(pei)(pei)養基(ji)，輕輕吹打細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)，把細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)吹落，吹散。③將細(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)(ye)(ye)按(an)1:2比(bi)例分到新的T25瓶中，添加適當的完-全培(pei)(pei)養基(ji)，把細(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)(ye)(ye)打勻，于培(pei)(pei)養箱中培(pei)(pei)養。；④注意(yi)培(pei)(pei)養基(ji)pH值變化(hua)和細(xi)胞(bao)(bao)密度(du)，定期換液(ye)(ye)(ye)(ye)（每周2-3次），待(dai)細(xi)胞(bao)(bao)密度(du)達到80%-90%時(shi)，重(zhong)復傳代操作或(huo)者凍存。

生長條件 培養溫度37℃；氣體環境5%CO2+95%空氣；
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
類型 貼壁生長
安全等級 1
形態 內皮細胞，短梭形，不規則形，邊緣不規則，單層貼壁生長，背景干凈
分離基物 bEnd.3小(xiao)鼠腦(nao)微血管內皮細胞是通過轉染NTKmT逆轉錄(lu)病(bing)毒載體轉化而來的，它(ta)表達了多瘤病(bing)毒中T抗原。