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產品更新-小鼠小腸上皮細胞

發布時間: 2023-06-14  點擊次數: 189次

產品更新-小鼠小腸上皮細胞 

 

培養基 90%DMEM-H+10%FBS
傳(chuan)代方(fang)法 復(fu)蘇步驟(zou):①凍存管(guan)從液氮或-80℃冰(bing)箱中(zhong)(zhong)取出放(fang)入(ru)PE手套(tao)中(zhong)(zhong),迅(xun)速沒入(ru)37℃水浴鍋,搖晃凍存管(guan)加(jia)速溶(rong)解,以1min內全部溶(rong)解為宜;②在超凈臺中(zhong)(zhong)將溶(rong)解好的(de)細(xi)(xi)胞液加(jia)入(ru)到裝有9mL完(wan)-全培(pei)養基的(de)離(li)心(xin)(xin)管(guan)內,1000-1200rpm離(li)心(xin)(xin)5min,棄去(qu)上清液,用(yong)1-2mL完(wan)-全培(pei)養基重(zhong)懸(xuan)細(xi)(xi)胞。③將細(xi)(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)到含(han)有5-6mL完(wan)-全培(pei)養基的(de)T25瓶中(zhong)(zhong),放(fang)入(ru)培(pei)養箱培(pei)養。


細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)傳(chuan)代:①將舊培(pei)養液吸(xi)(xi)除,PBS清洗兩遍(bian)后,加入1-2mL胰酶(mei)(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消(xiao)化(hua)情況,在細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)邊緣縮(suo)小,貼壁松動時(可(ke)用吸(xi)(xi)管(guan)吸(xi)(xi)起些許胰酶(mei)輕輕吹打細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)某處,肉眼(yan)可(ke)見細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)脫落,即消(xiao)化(hua)完(wan)成,否則繼續消(xiao)化(hua)),直接(jie)吸(xi)(xi)掉胰酶(mei),加入5-6mL完(wan)-全(quan)培(pei)養基,輕輕吹打細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng),把(ba)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)層(ceng)(ceng)吹落,吹散(san)。③將細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸液按1:2比(bi)例分到新的T25瓶中(zhong),添加適當的完(wan)-全(quan)培(pei)養基,把(ba)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸液打勻(yun),于培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。;④注(zhu)意培(pei)養基pH值變化(hua)和細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)密度(du),定期換液(每(mei)周2-3次),待細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)密度(du)達到80%-90%時,重復傳(chuan)代操(cao)作(zuo)或者(zhe)凍(dong)存。


生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
類型 貼壁生長
安全等級 1
形態 上(shang)皮細胞樣,梭形,邊緣(yuan)不規則(ze),單層貼壁生長(chang)

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